毛細(xì)血管電泳儀是一種用于生物領(lǐng)域的分析儀器，它以毛細(xì)管為分離通道，以高壓DC電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力，利用帶電粒子之間的遷移率差和分布系數(shù)差進(jìn)行分離。它的出現(xiàn)使分析科學(xué)繼液相色譜之后又一次大的進(jìn)步，使分析科學(xué)從微升級(jí)到納米升級(jí)，不僅使單細(xì)胞甚至單分子分析成為可能。用于分析時(shí)，取樣技術(shù)要求很高，用戶在使用時(shí)應(yīng)規(guī)范操作
1.注射區(qū)越小越好：
無論采用何種進(jìn)樣方式，毛細(xì)管插入樣品溶液的深度一般小于毛細(xì)管總長(zhǎng)度的1% ~ 2%，以盡量減小樣品溶液被毛細(xì)吸收到毛細(xì)管中的影響樣品管中的溶液小于5L，進(jìn)樣量為1 ~ 50 NL。
2.注射時(shí)間應(yīng)該短：
通常注射時(shí)間為0.5 ~ 1s，此時(shí)粘附在毛細(xì)管上的樣品量相對(duì)于吸入量可以忽略不計(jì)。
雖然毛細(xì)血管電泳儀的進(jìn)樣時(shí)間可以達(dá)到0.1s，但當(dāng)毛細(xì)管插入樣品管時(shí)，不可避免地會(huì)有一些溶液粘附，因此進(jìn)樣時(shí)間短會(huì)影響分析的重復(fù)性。
3.樣品的預(yù)濃縮：
受毛細(xì)管總體積的限制，毛細(xì)管電泳不能像高效液相色譜那樣通過增加進(jìn)樣量來提高檢測(cè)靈敏度，但可以采取一些措施來提高靈敏度。
首先當(dāng)樣品緩沖液的電導(dǎo)率明顯低于電泳緩沖液的電導(dǎo)率(100倍以上)時(shí)，在毛細(xì)管兩端施加電壓后，可在樣品區(qū)帶前后形成較大的電場(chǎng)，使樣品溶液中的分子遷移更快。當(dāng)這些分子到達(dá)電泳緩沖液的邊界時(shí)，由于電場(chǎng)的減弱，遷移速度變慢，使得樣品區(qū)帶變窄，濃度增加，從而達(dá)到濃縮的目的。
其次當(dāng)樣品緩沖液的電導(dǎo)率與電極緩沖液相同，且樣品濃度相對(duì)較薄，不適合進(jìn)一步稀釋時(shí)，可在注射前吸入部分水，也可達(dá)到濃縮的目的。
不管采用什么樣的進(jìn)樣方法，上述方法都能使樣品積累和濃縮。然而由于堆積區(qū)地區(qū)的電位急劇下降，該地區(qū)的溫度將會(huì)上升。
4.將毛細(xì)管插入樣品溶液后，應(yīng)立即開始取樣操作，完成后，應(yīng)迅速移至緩沖液中開始電泳。否則，會(huì)出現(xiàn)毛細(xì)和虹吸現(xiàn)象，導(dǎo)致誤差和光譜帶變寬。
5.盡可能保持系統(tǒng)不變。因?yàn)闇囟戎苯佑绊懻扯龋杂绊懞愣ǖ淖⑷肓俊?/div>
6.請(qǐng)勿將電極與毛細(xì)管接觸，樣品池和緩沖池的液位高度應(yīng)保持平衡。
7.防止樣品溶液和緩沖溶液蒸發(fā)和損失。
8.樣品溶液中的溶劑必須與緩沖溶液互溶，前者的離子強(qiáng)度應(yīng)低于后者。
更新時(shí)間：2021-02-24
點(diǎn)擊次數(shù)：1405
當(dāng)前位置：
